什么是显微镜的焦深？

焦深

    焦深也称为焦点的深度，当焦点对准样本的某一点时，不仅看清楚的是这一点，而且它的上下两侧也能同时看清楚，看到的物体不仅仅是一个平面，而且还看到有一定的厚度，这个清晰的厚度部分即是焦深。焦深的计算公式为：

D=k*η/(M*NA)  ①

式中:k为常数,约为240um;η为被检物体与物镜间介质的折射率;M为总放大率;NA为物镜的数值孔径,

由式①可知,总放大率愈高,数值孔径值愈大,焦深愈浅。焦深与显微照相关系密切,例如,一个用加拿大树胶(折射率1.5)封埋的6um厚的标本,当用40×,NA为0.65物镜和16×目镜观察时,按式①计算,其焦深为2.8 um,要看清这个标本的全厚度景像需要进行两次调焦;而当用100×,NA为1.25物镜和10×目镜观察时,其焦深为0.29 um,要看清这个标本的全厚度需要进行20次调焦。因此在显微摄影中,为了加大景深,照顾到多一点的内容,有时就用NA值低、放大率小的物镜和采用折射率较高的封藏剂。