霍夫曼调制相衬显微观察的操作方法

发布时间:2020-07-08
PMC调制相衬显微观察的操作方法

 PMC调制相衬显微观察的操作方法:

• 用低倍物镜(如10X)对样品进行聚焦;

• 聚光镜要定位在正确的工作距离并调整好光轴中心;

• 调节聚光镜狭缝孔径,使孔径带与物镜调制器相应区间对齐;

• 调节偏振器,实现显微图像衬度变化,适应不同折射率相位样品观察要求;

尽管PMC对中调节是非常简单地一次性完成,但建议对于初次使用应尽量仔细按照以下方法进行仪器调整,以达到最佳显微观察效果。.

(1) 将聚光镜系统安装在倒置显微镜上,如图19所示。安装时将有刻度标识的旋转盘面向操作者,并将聚光系统调整至刻线位置(见图5所示),以满足其正确的工作距离;

(2) 旋转聚光镜的转盘1 (如图19) (或移动拉板),将完

MC调制相衬显微观察的操作方法:

• 用低倍物镜(如10X)对样品进行聚焦;

• 聚光镜要定位在正确的工作距离并调整好光轴中心;

• 调节聚光镜狭缝孔径,使孔径带与物镜调制器相应区间对齐;

• 调节偏振器,实现显微图像衬度变化,适应不同折射率相位样品观察要求;

尽管PMC对中调节是非常简单地一次性完成,但建议对于初次使用应尽量仔细按照以下方法进行仪器调整,以达到最佳显微观察效果。.

(1) 将聚光镜系统安装在倒置显微镜上,如图19所示。安装时将有刻度标识的旋转盘面向操作者,并将聚光系统调整至刻线位置(见图5所示),以满足其正确的工作距离;

(2) 旋转聚光镜的转盘1 (如图19) (或移动拉板),将完全通光孔置于光路中;

(3) 将偏振器2 安装在聚光镜上部的固定轴上,如图19所示。
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注:一套PMC聚光镜组件包括聚光镜、一个或多个狭缝孔径(如图20-a)组成, 狭缝孔径用固定座(如图20-b)安装在转盘或拉板上,并将其设置在聚光镜的前焦平面上,每一组狭缝孔径都成像于调制相衬物镜的后焦平面,这一点同相位相衬是非常相似的。

(3) 安装PMC 物镜,将低倍物镜转入光路中并对样品聚焦,当聚焦清晰后,再将样品移出光路,这样对后续的聚光系统狭缝孔径与物镜调制器对中调节有帮助。

(4) 将聚光镜转盘旋至通光孔(O)位置,再利用一个对中目镜(对中望远镜)对物镜调制器聚焦(如图21-a),可以在对中目镜中观察到调制器的像,视场分为三个区域,分别为黑暗(D)、灰度区(G)与空白区(B) (如图21-a)。注:调制相衬物镜也可用于明视场、暗视场、荧光、偏光等,调制器的方向因物镜螺纹相对转换器安装孔的位置不同而呈现不同的方向(如图.21-b),这需要狭缝聚光镜的孔径调中与之匹配。


(5) 适当关小可变视场光阑1 (如图.22) ,可以对中目镜中观察到光阑像,如果光阑像偏离视场中心,可以通过聚光系统调中螺钉2 (如图.22) 调中,调整后如图.22-所示,然后再将可变视场光阑开至最大。

(6)  选择聚光镜狭缝孔径与相匹配的调制相衬物镜(如10X PMC 物镜对应10X 狭缝孔径), 本仪器的狭缝孔径安装在固定座内,可以任意旋转,也可进行适当水平移动,以便于同物镜调制器对中。

(7)  利用对中目镜对狭缝孔径与物镜调制器聚焦,在视场内可以观察到如图23-a所示的调制器与狭缝孔径像,如前所述,由于物镜是螺纹安装,因此调制器的方向是任意的,需要通过狭缝孔径的旋转与水平移动进行调中。狭缝孔径像中有两部分通光区间,一部分是透射区(T),另一部分是亮度受偏振器而改变的偏振区(P)(如图23-a)。

(8) 旋转狭缝孔径座,使矩形孔径的长边与物镜调制器的灰度区(G)平行,(如图23-b)。

(9) 水平移动狭缝孔径座,使透射区(T)完全进入到调制器的灰度区(G),偏振区(P)处于调制器空白区(B),见图 23-c所示。


(10) 旋转聚光系中的偏振器 (如图.19),注意观察此时偏振区的亮度变化,当偏振器与狭缝孔径中的偏振区平行时,偏振区(P)具有最大透射率,同时图像衬度最低,如图24-a所示,当偏振器旋转90度后,与狭缝孔径中的偏振区垂直时,即正交,此时偏振区(P)具有最小透射率,同时图像衬度最高,如图24-b所示。

(11)  转换另一个调制相衬物镜,同时选择与之相匹配的狭缝孔径,按着上述操作方法中的 (8)~(10)进行调整,再将其余物镜按同样方法进行调整。.

(12) 取出对中目镜,换上正常观察目镜,便可进行调制相衬显微观察。

通过上述调整后,在视场中可以观察到呈现三维状态的显微图像,如图25所示的硅藻,指纹图像。为了获得更加良好的观察效果,建议可采用单色光,如绿光、蓝光进行观察。.