荧光显微镜使用方法与注意事项

使用方法：

(1)将物料板放在舞台上。

（2）打开调节器荧光显微镜。然后按下启动一套UV灯不能接近15分钟内点燃，后收盘不能重新启动3分钟。

（3）将激励滤波器转换为V，将分色器调整为V，选择495或475nm阻塞滤波器。

(4)使用uvfl40、uvfl100萤光镜检查。

(5)将非荧光油加入到载玻片上，首先使用40X，然后用100X聚焦显微镜检测荧光。

（7）由于在由随时间推移的UV荧光增加照射荧光物质逐渐减弱，因此应不断变化的视野检查。

（8）紫外FL10或紫外FL20也可用作低倍显微镜材料（使用低倍显微镜时不加荧光油）。

荧光图像的记录方法：

荧光显微镜观察到的荧光图像具有形态特征，具有荧光颜色和亮度。在判断结果时，必须结合起来作出的判断。结果是根据主观指标，即工人的眼睛来记录的。作为一般的定性观测，它基本上是的。随着科技的发展，客观指标被用来记录判断结果，如使用细胞分光光度计、图像分析仪等仪器。但是，这些文书所记录的结果也必须与主观判断相结合。

荧光显微镜摄影对于记录荧光图像是非常必要的。由于荧光容易褪色和减弱，因此有必要对实时照相的结果进行记录。该方法与普通显微摄影方法基本相同。只需使用高速光敏膜，如ASA 200或以上或24。上面。由于紫外光对荧光的猝灭效应很大，如荧光标记物FITC等，在紫外光照射30s时，荧光亮度下降了50%，因此曝光速度太慢，无法捕捉到荧光图像。一般研究荧光显微镜有半自动或全自动显微摄影系统.

注意事项：

（1）严格按照操作说明书的要求制造的荧光显微镜，不改变该程序。

（2）检查应在暗室进行。进入暗室后，接通电源，点燃超高压汞灯5-15分钟。当光源发出强光并稳定下来时，眼睛有效适应暗室，然后开始观察标本。

(3)为防止紫外线对眼睛造成损害，调节光源时戴防护眼镜。

（4）每次检查时间为1～2h，超过90min，超高压汞灯的发光强度逐渐降低，荧光降低；紫外线照射3～5分钟后荧光降低。因此，不超过2~3h。

（5）荧光光学显微镜是有限的寿命，检查应聚焦在试样上，为了节省时间，保护光源。天热时，冷却风扇应添加，更换灯泡应该开始新的记录时间。后灯可以点亮，然后熄灭是，受灯充分冷却。每日数次，以避免火源。

（6）染色后，荧光会随着时间逐渐减弱。当试样在4℃下存放在聚乙烯塑料袋中时，可延迟荧光衰减时间，防止密封剂蒸发。

(7)荧光亮度的确定标准：一般分为四个级别，即"1"-NO或可见弱荧光。"++"-只能看到明显可见的荧光。"(+)+"-可见且明亮。